El método de inmersión de la observación microscópica implica la introducción de un líquido especial entre la lente del dispositivo y el objeto de estudio. Mejora el brillo y amplía el alcance de la ampliación de la imagen. Por lo tanto, el objeto puede ampliarse significativamente y sus elementos más pequeños pueden examinarse sin cambiar el equipo. En consecuencia, el líquido se llama inmersión. Puede servir como una variedad de composiciones. El más popular es el aceite de inmersión. Considere sus características con más detalle.
Información general
El primer aceite de inmersión para microscopía fue el cedro. Sin embargo, tenía un inconveniente importante. Con el tiempo, sus propiedades cambiaron y no permitió obtener los resultados deseados. Al aire libre, el líquido comenzó a condensarse gradualmente (hasta endurecerse). En consecuencia, el índice de refracción también cambió. En el siglo XX se empezó a producir aceite de inmersión sintético. Este líquido no tenía la deficiencia anterior.
Estándares de aceite de inmersión
Teclalos parámetros de fluido se establecen en GOST 13739-78. Según la norma, el aceite de inmersión tiene:
- índice de refracción nd=1,515±0,001;
- transmitancia en el rango espectral de 500 a 700 nm con un espesor de capa de 1 mm - 95 %, de 400 a 480 nm - 92 %;
La temperatura óptima a la que se puede utilizar el aceite de inmersión es de 20 grados. También existen estándares internacionales. Según ISO 8036/1, el índice de refracción es 1,518 + 0,0005, y la transmitancia en la capa de 10 mm para el rango espectral de 500 a 760 nm es del 95 %, y en 400 nm es del 60 %.
Los parámetros indicados corresponden a aceite de inmersión no fluorescente. La norma ISO 8036-1/2 define las características del líquido para la luminiscencia. La transmitancia en el rango espectral de 500 a 700 nm en una capa de 10 mm es 95%, de 365 a 400 nm - 60%.
Dificultades de las discrepancias de parámetros
La diferencia identificable en los estándares anteriores puede provocar el deterioro del rendimiento de una lente en particular cuando se usa un líquido inadecuado. Resultado:
- El contraste se reduce debido a la aberración esférica.
- El campo del objeto de investigación está coloreado.
- La iluminación en el plano del objeto bajo estudio y en el área de formación de su imagen se vuelve desigual.
- La imagen se vuelve borrosa.
Matices
Los microscopios ópticos tienen un límite superior de resoluciónun poco más de 100 veces. Con este nivel de aumento, la iluminación del objeto en estudio debe ser de alta calidad. De lo contrario, la imagen resultante será tan oscura que será imposible ver el objeto. El hecho es que la refracción y dispersión de la luz se produce entre el cubreobjetos y el objetivo. El aceite de inmersión contribuye a su mayor captación. Como resultado, la imagen se vuelve más clara.
Características de la refracción de la luz
¿Cómo se obtiene una imagen clara? En diferentes medios, la refracción de la luz ocurre de diferentes maneras. Por ejemplo, los ángulos de refracción de los rayos en el aire y el vidrio son diferentes. En el primer caso, el indicador es 1.0, en el segundo, 1.5. Este es el principal problema.
El uso del aceite permite reducir el índice de refracción de los rayos que atraviesan el objeto de estudio. El hecho es que el líquido tiene el mismo parámetro que el vidrio. Como resultado, se forma un medio homogéneo entre la diapositiva y la lente, y la mayor parte de la luz que pasa a través del objeto ingresa al instrumento. Esto da como resultado una imagen clara.
Puntos técnicos
Por regla general, los cilindros de las lentes de inmersión están grabados con aceite. El elemento en sí se usa cuando se necesita una apertura de 1.0 o más. Tales lentes de "inmersión" se utilizan para la inmersión directa en un líquido. En este sentido, están completamente sellados. Esto proporciona una alta protección contra daños por aceite en las lentes.
Clasificación
Los aceites se utilizan en la prácticados viscosidades: alta (tipo B) y baja (A). A menudo, en el empaque puede encontrar información sobre el índice de refracción. Por ejemplo, producen aceite de inmersión (100 ml), cuyo índice de refracción es 1,515. Los líquidos de baja viscosidad se aplican al espacio de aire y los de alta viscosidad, junto con los condensadores.
Términos de uso
Para obtener una imagen clara del objeto bajo estudio, debe seguir recomendaciones bastante simples:
- Encuentre el objeto bajo estudio en el control deslizante en el centro del campo con un pequeño aumento. Para ello, se utiliza una lente de bajo aumento.
- Gira la torreta.
- Introduzca la lente 100x en la posición de trabajo.
- Coloque una gota de aceite en el portaobjetos, la segunda en la lente.
- Ajuste la distancia de trabajo con enfoque fino hasta que el sujeto sea claramente visible.
Se debe tener cuidado al trabajar. Es importante evitar que entre aire entre el cubreobjetos y el objetivo.
Aceite de inmersión "Minimed"
Liquid se usa cuando se trabaja con lentes acromáticas y apocromáticas de cualquier tipo de dispositivos, excepto los luminiscentes. Según los expertos que han utilizado este aceite de inmersión, tiene varias propiedades útiles. El líquido mejora significativamente la visibilidad del objeto, minimizando el deslumbramiento, la pérdida de luz y las aberraciones ópticas. El uso de aceite amplía significativamente la gama de capacidades del equipo.
Limpiezaequipo
Después de trabajar con aceite de inmersión, es necesario poner el dispositivo en orden. La limpieza debe realizarse antes de que se seque la lente. Se utiliza papel limpio para lentes para eliminar los residuos de aceite. Se utiliza una hoja enrollada para limpiar todas las superficies de vidrio. El papel para lentes se debe humedecer con una solución para lentes y se debe eliminar cualquier resto de aceite.
Antecedentes históricos
El primer científico que explicó el mecanismo de inmersión fue Robert Hooke. En 1678 se publicó su libro Microscopium, en el que se daban todas las explicaciones. En 1812, se propuso la inmersión como medio para corregir las aberraciones de la lente. El autor de la idea fue David Buster. Alrededor de 1840, se fabricaron las primeras lentes de inmersión. Su creador fue D. B. Amici. Inicialmente, los investigadores utilizaron aceites de anís como líquido de inmersión. El índice de refracción era cercano al del vidrio.
