La variedad de infecciones bacterianas requiere una clara identificación del patógeno y la definición de su especie. Para determinar el tipo de microorganismo, los microbiólogos se benefician de sus propiedades tintóreas: la susceptibilidad del microbio a la tinción con varios tintes. Este método le permite explorar la morfología del patógeno. Las propiedades tintóreas de las bacterias son de gran importancia para la investigación práctica y teórica en el campo de la microbiología.
Investigación microbiana
En bacteriología, existen muchos métodos para teñir microorganismos. Todos ellos se basan en las propiedades tintóreas de las bacterias. La tinción le permite determinar su forma, estructura, tamaño, posición relativa. Esto permite resolver los problemas de sistematización de los tipos de microorganismos de biología general y microbiología comparada.
¿Por qué pintarlos?
Las bacterias son prácticamenteorganismos transparentes, y sin el uso de tinción, son poco visibles para la microscopía convencional. Puede usar tipos especiales de microscopía (contraste de fase, campo oscuro) para estudiar objetos, pero la forma más fácil es teñir, después de lo cual las bacterias se vuelven visibles en un microscopio de luz convencional.
Preparación de muestras
Independientemente de la técnica de tinción utilizada, existen reglas uniformes para preparar el objeto en estudio. Las siguientes etapas son obligatorias:
- Los instrumentos estériles hacen un frotis en un portaobjetos de vidrio.
- La muestra se está secando. Esto se hace a temperatura ambiente o utilizando armarios de secado.
- Seguido de la etapa de fijación: los microorganismos se adhieren al vidrio con compuestos especiales.
- Tinción adecuada: la muestra se cubre con tinte durante un período de tiempo fijo, después de lo cual se lava.
- Secado final: la muestra se seca de nuevo.
Los tintes más comunes
Los colorantes más utilizados son a base de anilina con diferentes índices de acidez (pH). La mayoría de los tintes son polvos que se diluyen en alcohol.
Los colorantes en los que los cationes son los agentes colorantes se denominan básicos (pH superior a 7). Se pueden utilizar para teñir microorganismos en colores rojo (magenta, safranina), violeta (violeta de metilo, tionina), azul (azul de metileno), verde (verde de malaquita), marrón (crisoidina) y negro (indulina).
Los colorantes en los que los colorantes son aniones se denominan ácidos (pH inferior a 7). Tiñerán la muestra de rojo (eosina), amarillo (picrina) o negro (nigrosina).
Existe un grupo de colorantes neutros (por ejemplo, la rodamina B), donde tanto los cationes como los aniones actúan como agentes colorantes.
Cultura muerta o viva
Los métodos de tinción se dividen en dos grupos según la forma de vida de la muestra de prueba.
- Tinción vital (de por vida). Este método de estudio de las propiedades de los microorganismos se utiliza en el estudio de tejidos vivos, lo que permite observar los procesos vitales de los microbios. Para esta tinción se utilizan colorantes de baja toxicidad y alto poder de penetración.
- Tinción posvital. Esta es la tinción de microorganismos muertos o muertos. Gracias a las propiedades tintóreas de las bacterias, los microbiólogos determinan su estructura. Es esta tinción la más utilizada.
Gram-positivas y Gram-negativas
Son estas características de las bacterias las que se pueden encontrar en las instrucciones de varios medicamentos. Este método de estudio de las propiedades tintóreas de las bacterias se basa en el uso del tinte violeta de genciana y la fijación con yodo. Esta es la técnica de Hans Christian Gram, médico danés que la propuso en 1884. Como resultado de esta tinción, las bacterias se dividen en dos grupos:
- Gramo (+) - se vuelve azul(estafilococos y estreptococos).
- Gram (-) - tinción de rosa a rojo (enterobacterias, salmonella, E. coli).
Los diferentes resultados de tinción se deben a las diferentes propiedades tintóreas de las paredes bacterianas. El método de tinción de Gram sigue siendo el principal en el diagnóstico de algunas enfermedades infecciosas.
Otras técnicas de tinción
Caractericemos algunos métodos más ampliamente utilizados en bacteriología.
- Método de Ziehl-Nelson: determina la resistencia a los ácidos de las bacterias. Identifica los agentes causales de la tuberculosis y la micobacteriosis.
- Técnica de Romanovsky-Giemsa: tiñe de rojo las bacterias acidófilas (ácido acético y ácido láctico) y de azul las basófilas (espiroquetas y protozoos).
- Técnica de Morozov: tiñe las bacterias de marrón y hace visibles sus flagelos.
Se pueden ver las esporas
La tinción de fuccina de
Tsiel le permite ver las esporas bacterianas. Al tener un color rosado después de la tinción, son claramente visibles contra el fondo de bacterias azules. Este método es también una herramienta de la bacteriología y tiene una gran importancia práctica.
