El caldo selenita es un medio de enriquecimiento con propiedades selectivas, diseñado para aislar bacterias patógenas del género Salmonella (del lat. Salmonella). Es muy efectivo si es necesario detectar este patógeno en particular entre otros representantes de la microflora intestinal. El medio se utiliza tanto para el diagnóstico clínico como con fines sanitarios en las pruebas de alimentos.
Características generales
El caldo de selenita se prepara a base de un polvo, que es una mezcla homogeneizada de varios componentes de la composición. El color del material seco puede ser amarillo claro o crema, según el tipo de medio. El polvo tiene propiedades de flujo libre.
El caldo de selenita Ready es un medio líquido transparente de color amarillo claro. Esta masa se vierte en recipientes donde se realiza la siembra para su posterior incubación.
Hay tres tipos principales de caldo de selenita:
- medio puro: adecuado para el aislamiento de Salmonella a partir de material clínico y sanitario;
- con la adición de manitol (caldo de dos componentes) - diseñado para trabajar solo con material clínico;
- medio de cisteína-selenita: se puede utilizar para aislar Salmonella del biomaterial patológico del paciente (heces, orina, etc.).
Estos tipos son ligeramente diferentes en composición y características de acción.
La tarea principal del caldo de selenita es promover la acumulación de salmonella, inhibiendo el crecimiento de la microflora acompañante. Esto hace posible no solo detectar el patógeno en el material, sino también transferirlo posteriormente a agar. El medio fue desarrollado por Leifler, quien fue el primero en descubrir el efecto selectivo del selenita contra la Salmonella.
Composición
El caldo de selenita contiene:
- hidrolizado de caseína;
- lactosa;
- fosfato de sodio;
- hidroselenita de sodio.
El medio de selenita-cisteína, además de estos componentes, contiene L-cisteína e hidrógeno fosfato de sodio. La composición del caldo manitol difiere en que en lugar de hidrolizado de caseína, incluye digerido péptico de tejido animal. No hay lactosa en tal ambiente, pero hay manitol. Este último actúa como sustrato fermentable y aporta las propiedades amortiguadoras del caldo.
Todos los componentes del polvo, excepto el hidroselenito de sodio, se denominan condicionalmente parte A, y la sustancia selectiva se denomina parte B.
El principio de funcionamiento y las propiedades del medio ambiente
El caldo de selenita funciona como medio de almacenamientocon acción selectiva. El efecto selectivo se proporciona debido a la toxicidad del selenita, que inhibe el crecimiento de la mayoría de los microorganismos. Al mismo tiempo, las bacterias del género Salmonella son capaces de restaurar este compuesto, eliminando así el efecto tóxico en sus propias células. Sin embargo, como resultado de la reacción, se forma un álcali que reduce el efecto perjudicial del selenito sobre el crecimiento de la microflora asociada y, por lo tanto, se hace necesario estabilizar el pH. Esta función la realizan bacterias que fermentan la lactosa con la formación de ácido. El tampón del medio lo proporciona el fosfato.
En caldo de dos componentes, el manitol estabiliza el pH. El medio cisteína mejora el efecto selectivo frente a Salmonella. Tal caldo es efectivo para controlar el fondo infeccioso en pacientes con una etapa no aguda de la enfermedad o convalecientes.
La manifestación de las características de crecimiento de las cepas de referencia en el medio se puede observar después de 12 a 24 horas desde el inicio de la incubación. En este caso, la Salmonella forma colonias incoloras.
Características de cocción
La preparación del medio se realiza en dos etapas. Primero se hace una solución con un componente selectivo a razón de 4 gramos de selenito de sodio por litro de agua destilada. Luego agregue 19 gramos del polvo principal (parte A). La solución se mezcla completamente y se calienta hasta que las partículas se disuelven por completo, después de lo cual se vierte en tubos de ensayo estériles.
Al cocinar, es importante seguirrégimen de temperatura, ya que el medio es inestable al sobrecalentamiento. La esterilización del caldo se puede realizar solo en un baño de agua o usar un chorro de vapor. La esterilización en autoclave del medio está estrictamente prohibida.
