Ensayo radioinmune en microbiología: aplicación, mecanismo

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Ensayo radioinmune en microbiología: aplicación, mecanismo
Ensayo radioinmune en microbiología: aplicación, mecanismo
Anonim

La medicina moderna cuenta con métodos de diagnóstico específicos que permiten establecer la etiología de las enfermedades en humanos a partir de la definición del patógeno, sustancias genéticamente extrañas que estimulan la respuesta inmunitaria, ácidos nucleicos, así como alteraciones alérgicas e inmunitarias que ocurren debido a sus acciones. Hoy en día, RIA se usa ampliamente en inmunología y virología, es decir, radioinmunoensayo, los objetivos del entorno, los componentes, el curso, cuya contabilidad consideraremos en este artículo. Este ensayo es capaz de detectar antígenos como resultado de su interacción con anticuerpos.

radioinmunoensayo
radioinmunoensayo

Definición

RIA es un método para diagnosticar sustancias biológicamente activas en líquidos, que se basa en la reacción de antígenos con anticuerpos cuando se utilizan sustancias análogas marcadas con radionúclidos que tienen sistemas de unión especiales. Después de su interacciónse forma un inmunocomplejo, que se separa y se estudia su radiactividad. Se sabe que el radioinmunoensayo se lleva a cabo utilizando kits de reactivos estándar.

Cada reactivo puede determinar la concentración de una sustancia específica. El fluido biológico extraído de una persona se mezcla con un reactivo, después del período de incubación, se separan las sustancias radiactivas libres y ligadas, luego se realiza la radiometría y se calculan los resultados. Un isótopo de yodo se usa para etiquetar sustancias. Se marca y se agrega en cierta cantidad.

radioinmunoensayo microbiología
radioinmunoensayo microbiología

Solicitud

El análisis radioinmune tiene una amplia aplicación en medicina y microbiología. Se utiliza para diagnosticar enfermedades cardíacas y vasculares, enfermedades del sistema endocrino y otros sistemas del cuerpo. Los RIA también se utilizan a menudo para identificar la causa de la infertilidad, la patología del desarrollo fetal. En oncología, este análisis se realiza con el fin de determinar los marcadores de neoplasias para poder monitorizar la eficacia del tratamiento. En inmunología, RIA se utiliza para estudiar la presencia de inmunoglobulinas, enzimas, proteínas, etc. en la sangre. Hoy, este análisis le permite detectar la concentración de varias hormonas hasta una millonésima de un gramo. Por lo tanto, el análisis de sangre radioinmune se usa ampliamente en cardiología, oncología, endocrinología, ginecología y virología.

aplicación de radioinmunoensayo
aplicación de radioinmunoensayo

Métodos RIA

Se acostumbra distinguir entre varios métodos de análisis, dependiendo de la naturalezareacciones:

  1. El método no competitivo se caracteriza por componentes de reacción tales como antígenos estándar y detectables, solución tampón, anticuerpos marcados con isótopos, ciertos anticuerpos que se unen al sorbente. Se añade un antígeno a los anticuerpos que se van a analizar. Después de la incubación, aparecen complejos antígeno-anticuerpo, se lava el sorbente, se agregan anticuerpos marcados que se unen al antígeno en el complejo. La radiactividad depende de la concentración del antígeno que se está analizando.
  2. El radioinmunoensayo competitivo se basa en la competencia entre antígenos. Aquí hay componentes de la reacción como antígenos de control y determinados, una solución tampón, ciertos anticuerpos que se unen al sorbente, así como un antígeno marcado con isótopos. El diagnóstico comienza con la introducción del antígeno que se está examinando. Se forma un complejo antígeno-anticuerpo en el adsorbente. Luego se lava el sorbente y se inyecta el antígeno marcado. Al hacerlo, se une al anticuerpo. Con la ayuda de contadores, se miden la reacción y la cantidad de radiactividad. Será en proporción inversa a la cantidad de antígeno en la muestra.
  3. El método indirecto es el más común. En este caso, el radioinmunoensayo del componente de reacción tiene como suero de control y de prueba, antígenos o anticuerpos que se unen al sorbente, anticuerpos marcados con isótopos, soluciones tampón. Los anticuerpos o antígenos que se diagnostican reaccionan con antígenos o anticuerpos que están unidos al sorbente. Luego se retira el incubado, se inyectan anticuerpos marcados, que se unen acomplejos antígeno-anticuerpo.

Metodología de análisis

Entonces, el radioinmunoensayo se lleva a cabo con reactivos especiales. Los conjuntos son estándar, por lo que no se permiten errores ni violaciones. Los resultados del diagnóstico son fiables. El análisis se realiza por la mañana, para ello toman sangre venosa de una persona. En el laboratorio, el suero se separa de la sangre, que se utilizará para RIA. Este suero se mezcla con reactivos. La mezcla resultante se incuba a una temperatura determinada en un termostato.

Los isótopos libres y ligados se separan en la mezcla resultante. Después de eso, se examina el material recibido y se calculan los resultados. El mecanismo de radioinmunoensayo tiene varias opciones. La técnica descrita anteriormente es un RIA en fase líquida, ya que todos los componentes están en estado líquido. Hay RIA y fase sólida, donde los anticuerpos se colocan en un vehículo que no se disuelve en líquido.

examen de sangre radioinmune
examen de sangre radioinmune

Disponibilidad de diagnósticos

El uso de este método de diagnóstico en medicina es cada vez más popular cada año. Recientemente, el radioinmunoensayo se ha convertido en un método de diagnóstico estándar que puede ser recetado por un médico al hacer un diagnóstico final. Durante mucho tiempo este tipo de análisis se realizó solo en laboratorios, hoy se ha convertido en un método de investigación común. Pero RIA requiere el uso de equipos costosos (contadores gamma) y los kits de reactivos tienen una vida útil corta. Todo esto es el principal inconveniente de tal análisis, que determina sucosto caro.

Además, RIA ha comenzado recientemente a suplantar métodos de investigación más modernos que no requieren interacción con isótopos. Estos incluyen inmunoensayo enzimático. Por lo tanto, RIA es deseable en muchas clínicas. Se ha utilizado durante mucho tiempo en las grandes ciudades y centros de diagnóstico, pero en los hospitales ordinarios de las pequeñas ciudades este análisis prácticamente no se utiliza debido a su alto costo.

componentes de radioinmunoensayo
componentes de radioinmunoensayo

Dignidad de RIA

Radioinmunoensayo tiene muchas ventajas. Es bastante específico y tiene una alta sensibilidad, lo que permite determinar la presencia de sustancias biológicamente activas en cantidades increíblemente pequeñas. Este análisis se realiza de manera muy sencilla, solo se requiere que una persona done sangre venosa. Los resultados de las pruebas son 100 % precisos y están listos al día siguiente. RIA también se puede automatizar fácilmente. Por lo tanto, este análisis le permite identificar proteínas que son productos de desecho de bacterias infecciosas, lo que indica la presencia de infección en el cuerpo.

análisis radioinmune del objetivo de establecer la contabilidad del progreso de los componentes
análisis radioinmune del objetivo de establecer la contabilidad del progreso de los componentes

Diagnóstico en Virología

El RIA más prometedor es para virología, porque le permite identificar rápidamente patógenos virales. Esto se debe a que en los últimos años ha ido creciendo la incidencia de diversas infecciones, las cuales se están propagando a gran velocidad provocando la mortalidad entre las personas. Esto es especialmente cierto para los países que no tienen un altodesarrollo social y económico (los países del Lejano Oriente), el radioinmunoensayo es simplemente indispensable aquí. La microbiología también utiliza este método de diagnóstico para detectar enfermedades infecciosas causadas por bacterias patógenas. Por ejemplo, RIA se usa ampliamente para detectar fiebre tifoidea. En los primeros días de la enfermedad, antes de la cita del tratamiento, es necesario realizar un estudio de heces y vómitos. Sin embargo, los resultados del diagnóstico se obtendrán después de mucho tiempo. Aquí RIA viene al rescate, el análisis le permite identificar el agente causal de la enfermedad en poco tiempo. Una persona dona sangre, al día siguiente están listos los resultados del estudio. Este análisis ayuda a hacer un diagnóstico preciso.

Resultados

El radioinmunoensayo es actualmente uno de los métodos de diagnóstico más sensibles. Se utiliza para analizar cualquier sustancia contra la que se puedan obtener anticuerpos. Este método permite realizar muchas muestras en el menor volumen del líquido investigado, así como registrar los resultados en el menor tiempo posible, ya que puede ser completamente automatizado. Este análisis fue desarrollado en la década de 1950 por Solomon Burson. Treinta años después, se generalizó. A la fecha, no existe una alternativa cien por cien al RIA, ya que el análisis tiene una alta sensibilidad. RIA se utiliza en diversas ramas de la medicina, así como en microbiología y virología.

mecanismo de radioinmunoensayo
mecanismo de radioinmunoensayo

Finalmente

El uso del método en virología es muy relevante hoy en día, ya que dala capacidad de investigar la propagación de infecciones, hacer un diagnóstico preciso y prescribir un tratamiento específico. Este problema es especialmente relevante para países que tienen un bajo nivel de desarrollo económico y social. Además, este análisis le permite detectar la cantidad de hormonas y enzimas en el cuerpo humano. Para obtener resultados confiables, el investigador solo necesita donar sangre para análisis. La medicina no se detiene, junto con el radioinmunoanálisis aparecen nuevos métodos de investigación, pero RIA sigue siendo uno de los líderes en diagnóstico médico.

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