Métodos para configurar una reacción de precipitación

Tabla de contenido:

Métodos para configurar una reacción de precipitación
Métodos para configurar una reacción de precipitación
Anonim

Este artículo estará dedicado al fenómeno de la reacción de precipitación. Aquí consideraremos las características de la formulación de este fenómeno, el fenómeno de la difusión, las características generales, el papel en la vida humana y mucho más.

Introducción al fenómeno

reacción de precipitación característica general
reacción de precipitación característica general

La precipitación es un fenómeno de tipo serológico, durante el cual los antígenos solubles interactúan con los anticuerpos y, como resultado, se observa la precipitación: un precipitado.

La característica general de la reacción de precipitación es una forma de influencia coordinada de antígeno y anticuerpo. Estos tipos de interacciones permiten determinar la presencia de antígenos desconocidos en la sustancia de prueba mediante la adición de anticuerpos y antígenos conocidos. El proceso de precipitación sin la presencia de sales procederá peor, y el mejor óptimo se encuentra dentro del rango de 7.0-7.4 pH.

Constituyentes de una reacción

componentes de la reacción de precipitación
componentes de la reacción de precipitación

Hay tres elementos principales entre los componentes de la reacción de precipitación:

  1. Antígeno de naturaleza molecular. Está en el estado de tipo fino, en otras palabras, essoluble. Además, dicho antígeno se denomina precipitógeno, que es un lisado o extracto de tejido, etc. Un precipitógeno tiene una diferencia característica con respecto a un aglutinógeno, que reside en el tamaño de las partículas que lo componen. El aglutinógeno tiene un tamaño de célula inherente y los precipitógenos se corresponden con el tamaño de la molécula. La solución de antígeno se caracteriza por su transparencia.
  2. Un anticuerpo que se encuentra en el suero sanguíneo humano, así como en el suero de diagnóstico inmunológico, que contiene los anticuerpos estudiados.
  3. Los electrolitos son soluciones de cloruro de sodio que son isotónicas.

Producción de precipitógeno

La preparación de una reacción de precipitación es imposible sin un precipitógeno, que se obtiene triturando materiales y extrayéndoles antígenos proteicos. La extracción se produce por ebullición u otros métodos.

Los lisados, así como extractos de tejidos y órganos, suero sanguíneo, diversos tipos de filtrados basados en caldos de cultivo microbianos, así como extractos de sal de microorganismos y sustancias autolisadas, son ejemplo de precipitógenos.

Instalación en precipitaciones

Ahora consideremos el método para configurar la reacción de precipitación.

Se realiza una reacción de precipitación en anillo, que tiene lugar en tubos de ensayo especialmente preparados. El suero se introduce en la cavidad de los platos, vertiéndolo sobre la pared con la ayuda de un pico de pipeta. A continuación, la cantidad adecuada de precipitador se coloca cuidadosamente en capas en la parte superior y luego el tubo se lleva a una posición vertical desde una posición horizontal. Configurar y tener en cuenta la reacción de precipitación es una operación muy meticulosa. El resultado se registra tras la aparición de un anillo blanco en el borde entre el antígeno y el anticuerpo. Si los elementos reactivos de la reacción se corresponden entre sí, entonces se unen, pero esto se nota después de un largo período de interacción.

La reacción de precipitación también se lleva a cabo en una placa de Petri o en un vaso portaobjetos, donde se transfiere el gel de agar, aplicándolo en una pequeña capa. Después de que se endurece en el gel, se corta una pequeña cantidad de pocillos en los que se colocarán los antígenos y los anticuerpos. Hay dos formas de realizar esta acción: el método de inmunodifusión radial y la inmunodifusión doble.

No se utiliza la reacción de precipitación
No se utiliza la reacción de precipitación

Información general

La mecánica del trabajo de precipitación es similar al dispositivo de aglutinación. Bajo la influencia del suero de tipo inmune, el antígeno, que ya ha entrado en reacción, reduce su grado de dispersión. Una condición importante es la transparencia tanto del suero como del antígeno.

Puede mejorar el registro de la reacción si superpone antígenos a anticuerpos. Como resultado, se puede observar la aparición de precipitados en forma de anillo. Este fenómeno se denomina precipitación anular y se lleva a cabo en tubos especiales que tienen un diámetro de 2,5 a 3,5 mm. Uno de los ejemplos más comunes de una reacción de precipitación es el diagnóstico de ántrax.

La precipitación permite determinar el nivel de toxigenicidad de un cultivo de difteria en agar.

Durante la reacción en cuestiónse produce la precipitación de complejos antigénicos y anticuerpos. La precipitación es un fenómeno inmunológico que permite determinar la cantidad de anticuerpos en el suero sanguíneo de una persona y animales enfermos o vacunados.

Consecuencia de la titulación

métodos para establecer una reacción de precipitación
métodos para establecer una reacción de precipitación

Es importante saber que los datos obtenidos por titulación del método anterior no son cuantificables. Para crear y analizar una evaluación cuantitativa del número contenido de anticuerpos, M. Heidelberger y E. Kabat desarrollaron una técnica de reacción especial, que se basa en la búsqueda e identificación de la zona de equivalencia. Mezclar el número de edad de los antígenos con un volumen constante de antisuero conduce a un aumento en el precipitado formado inicialmente, y luego nuevamente disminuye debido a un aumento en la capacidad de disolver los complejos de antígenos. Al determinar la cantidad de anticuerpos en los sobrenadantes contenidos en cada tubo, puede encontrar que f altará líquido en un cierto número de placas con anticuerpos. Aquí, en comparación con otros tubos de ensayo, se formará el precipitado más grande. Debido a esto y a la sustracción del precipitado de proteína antigénica del valor total de proteínas, es posible obtener el valor exacto de los anticuerpos contenidos en el volumen del suero específico que se está estudiando. Además, la cantidad de moléculas de proteína del precipitado se determina por la cantidad de nitrógeno o utilizando métodos colorimétricos.

Evaluación de valores

ajuste y contabilización de la reacción de precipitación
ajuste y contabilización de la reacción de precipitación

La estimación de los valores de precipitación en la metodología diagnóstica debe tener en cuenta la posibilidad de la presencia en el suero inmunitario de un anticuerpo que no tenga la propiedad de la precipitina, de lo que se deduce que el propio precipitado puede no ser formado después de reaccionar con antígenos. La lista de tales moléculas incluye anticuerpos incompletos y algunas especies del grupo de las globulinas gamma-A.

La reacción de precipitación en condiciones de laboratorio encuentra su aplicación en varios tipos de modificaciones. Por ejemplo, la reacción de termoprecipitación se utiliza para detectar antígenos bacterianos de botulismo, ántrax, etc., que no sufren desnaturalización térmica. A diferencia de la precipitación en anillo, este tipo de reacción utiliza filtrados del material en cuestión en estado de ebullición.

El análisis de la reacción de precipitación en una mezcla compleja no permite caracterizar las propiedades de los elementos individuales de la mezcla. En tales casos, una persona recurre al método de precipitación en agar y también utiliza inmunoelectroféresis.

Precipitación difusa

reacciones de precipitación
reacciones de precipitación

En esta área de investigación, existe el concepto de reacción de precipitación difusa (RPD). Se basa en la capacidad de difusión en el gel de anticuerpos y antígenos solubles. La difusión es la capacidad de una molécula de cierta sustancia para penetrar en las moléculas de otra, lo cual es causado por el movimiento térmico.

Gel es un sistema de tipo disperso en el que la fase líquida se distribuye uniformemente en la fase sólida. Muy a menudo, se usa gel de agar para tal reacción.

Después de dar los parámetros, enEn las condiciones en que las moléculas pueden difundirse unas con respecto a otras, su encuentro irá acompañado de la formación de un complejo antígeno + anticuerpo. Tal neoplasia puede difundirse, estando en el propio gel, y se precipitará, tomando la forma de una tira que se puede detectar a simple vista. Si el antígeno y el anticuerpo son homólogos, no se formará ninguna banda.

La creación de las condiciones en las que tendrá lugar la difusión en la capa de agar implica verter los componentes, pero el número total de pocillos y su posición relativa está determinado por decidir el tipo de tarea que se requiere. RPD le da a una persona la capacidad de detectar e identificar virus aislados desconocidos mediante pruebas con sueros de anticuerpos conocidos.

Solicitud

reacción de precipitación difusa
reacción de precipitación difusa

La precipitación se usa ampliamente no solo en el diagnóstico de enfermedades, sino que también encuentra su aplicación en el examen médico forense. Es difícil imaginar un análisis en el que sea posible determinar la especie de sangre, parte de un órgano o tejido encontrado en un arma criminal que no utilice la reacción de precipitación. Durante este proceso, se utilizan sueros precipitantes, que se obtienen inmunizando varios animales y aves. Es importante que el nivel de título sérico no sea inferior a 1:10000, y también debe tener suficiente especificidad. De la mancha de sangre detectada o de su costra, se hace un extracto para examen físico. solución, que estará más expuesta aprecipitar el suero. De acuerdo con esta reacción, es posible establecer los tipos de proteínas de tejidos y órganos tanto de humanos como de animales. La obtención de extractos turbios obliga a recurrir a la precipitación en agar.

Conclusiones

Al analizar la información leída, podemos concluir que las reacciones de precipitación son extremadamente importantes para una persona, ya que permiten diagnosticar varios antígenos utilizando anticuerpos, este fenómeno también es ampliamente utilizado en el examen médico forense y permite identificar el tipo de sangre, tejido u órgano en relación con un tema en particular. Existen varios tipos y métodos de precipitación, que se utilizan de acuerdo con las necesidades emergentes del problema que se está resolviendo.

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