Microscopía de luminiscencia: características del estudio

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Microscopía de luminiscencia: características del estudio
Microscopía de luminiscencia: características del estudio
Anonim

El término "microscopía" tiene raíces griegas. En traducción, significa el estudio de objetos usando instrumentos de alta precisión. Recientemente, la microscopía de fluorescencia y electrónica se han vuelto cada vez más populares.

microscopio fluorescente
microscopio fluorescente

Resolución

Debajo, por regla general, entienden la distancia mínima a la que se pueden ubicar objetos claramente distinguibles. El grado de penetración en el mundo microscópico, la capacidad de considerar el tamaño del elemento en estudio dependerá de la resolución del equipo. A gran aumento, los límites de los objetos pueden fusionarse. En consecuencia, hay ciertos límites más allá de los cuales la aproximación de elementos no tiene sentido.

Método de microscopía de luminiscencia: mecanismo

Cuando la energía absorbida por una sustancia se convierte en radiación visible, se produce un resplandor. Se llama luminiscencia. Este fenómeno se debe al hecho de que algunas sustancias, bajo la influencia de la luz, comienzan a emitir rayos con una longitud de onda diferente (generalmente grande). Además, algunos objetos que, bajo iluminación normal, tienen ciertacolor, bajo la influencia de los rayos ultravioleta cambian su color.

método de microscopía de fluorescencia
método de microscopía de fluorescencia

Especificaciones

Un objeto que no se puede ver bajo la luz ultravioleta puede emitir un brillo brillante si se trata con una sustancia especial. En él, los elementos brillan en diferentes colores en la oscuridad. La fuerza de la radiación es diferente, pero, por regla general, es pequeña. En este sentido, la microscopía de fluorescencia es eficaz en una habitación a oscuras. Al utilizar este tipo de estudio, el objeto se ve en la luz que él mismo emite. La composición química de los tejidos, las células afectará la calidad del estudio. La microscopía de fluorescencia se considera un estudio histoquímico hasta cierto punto.

Clasificación

La microscopía de fluorescencia puede ser primaria o secundaria. En este último caso, el objeto se procesa con compuestos especiales que le dan un brillo. La microscopía fluorescente primaria se basa en la propia capacidad del elemento para emitir luz.

microscopía fluorescente y electrónica
microscopía fluorescente y electrónica

Equipo

La microscopía de fluorescencia se realiza utilizando una variedad de dispositivos. Su elemento principal es el iluminador. Está equipado con una lámpara UV. Además, los dispositivos utilizan un conjunto de filtros. En algunos dispositivos, hay bastantes configuraciones diferentes. Según el color que se utilice para excitar la luminiscencia, ultravioleta o azul, se coloca un filtro adecuado entre la fuente de luz y el objeto de estudio. Dado que el resplandor de un elemento microscópico es energéticamente más débil que la luz excitante, será capturado solo bajo una condición. El exceso de rayos de la fuente debe ser cortado por un filtro amarillo-verde. Se encuentra en el ocular del dispositivo. El efecto de luminiscencia más pronunciado será cuando el filtro corte por completo los rayos que emanan de la fuente de luz.

¿En qué consiste una instalación de luz visible? Contiene una fuente de luz brillante y un microscopio biológico. Se coloca un filtro azul-violeta entre el espejo del dispositivo y la lámpara. Puede ser FS-1, UFS-3, etc. El filtro amarillo se coloca en el ocular del microscopio. Con su ayuda, la luz azul-violeta cae sobre el objeto. Excita la luminiscencia. Pero esta luz puede interferir con ver el brillo. Por lo tanto, en el camino hacia el ojo, está cortado por un filtro amarillo. La iluminación se ajusta según el método Koehler, con una excepción. El diafragma del condensador debe estar completamente abierto. Al examinar, es importante utilizar un aceite de inmersión no fluorescente. Para reducir su propio brillo, se le agrega nitrobenceno (2-10 gotas / 1 g).

aplicación de microscopía de fluorescencia
aplicación de microscopía de fluorescencia

Microscopía de luminiscencia: aplicaciones en microbiología

Los beneficios de este tipo de estudio son:

  1. Capacidad de imagen en color.
  2. Elementos autoemisores de alto contraste sobre fondo negro.
  3. Detección y localización de ciertos tipos de virus y microbios.
  4. La capacidad de estudiar lo transparente y lo opacoorganismos vivos.
  5. Estudio de los procesos vitales en su dinámica.

También hay que decir que la microscopía luminiscente contribuye al desarrollo de los mejores métodos de histo y citoquímica, diagnóstico rápido.

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