La investigación sobre bacterias requiere un trabajo minucioso con numerosos equipos e instrumentos. Para que los microorganismos se multipliquen lo más rápido posible en condiciones de laboratorio y puedan mantener una actividad vital normal, se utilizan medios nutrientes especiales. Su composición y condiciones biofísicas son adecuadas para el crecimiento activo de un cultivo bacteriano.
Medios nutritivos. Microbiología y otras aplicaciones
Las colonias bacterianas se cultivan en el laboratorio en placas de Petri llenas de contenido gelatinoso o semilíquido. Estos son medios nutritivos, cuya composición y propiedades son lo más cercanas posible a las naturales para el crecimiento de cultivos de alta calidad.
Estos entornos se utilizan en la investigación microbiológica y en los laboratorios de diagnóstico médico. Estos últimos trabajan con mayor frecuencia con frotis de bacterias patógenas u oportunistas, cuya posición sistemática se determina directamente en la institución.
Naturales y sintéticosmiércoles
La regla básica para trabajar con bacterias es la selección correcta del medio nutritivo. Debe cumplir numerosos criterios, incluido el contenido de micro y macro elementos, enzimas, un valor constante de acidez, presión osmótica e incluso el porcentaje de oxígeno en el aire.
Los medios nutritivos se clasifican en dos grandes grupos:
- Entornos naturales. Tales mezclas se preparan a partir de ingredientes naturales. Esto puede ser agua de río, partes de plantas, estiércol, vegetales, tejidos de plantas y animales, levaduras, etc. Dichos ambientes se caracterizan por un alto contenido de químicos naturales, cuya variedad promueve el crecimiento de cultivos bacterianos. A pesar de estas ventajas obvias, los ambientes naturales no permiten la investigación especializada con cepas bacterianas específicas.
- Medios sintéticos. Se diferencian en que su composición química se conoce en proporciones exactas de todos los constituyentes. Dichos medios se preparan para un cultivo específico de bacterias, cuyo metabolismo es conocido de antemano por el investigador. En realidad, por esta razón, es posible preparar dicho entorno sintético para el desarrollo de microorganismos. Se utilizan para analizar la actividad vital de las bacterias. Por ejemplo, puedes averiguar qué sustancias liberan al medio ambiente y en qué cantidad. Los microorganismos también crecerán en medios naturales, pero es imposible rastrear cualquier cambio cuantitativo en la composición debido a la ignorancia de las proporciones iniciales de las sustancias.
Diferencial-entornos de diagnóstico
Al trabajar con bacterias, no solo se pueden usar medios nutrientes ordinarios. La microbiología es una ciencia vasta y, por lo tanto, al realizar un estudio, a veces es necesario hacer una selección de microorganismos por alguna razón. El uso de medios de diagnóstico diferencial en el laboratorio permite seleccionar las colonias bacterianas deseadas en una placa de Petri según el signo bioquímico de su actividad vital.
La composición de dichos entornos siempre incluye los siguientes componentes:
1. Nutrientes para el crecimiento celular.
2. Sustrato analizado (sustancia).
3. Un indicador que dará un color característico cuando ocurra una determinada reacción.
Un ejemplo es el medio nutritivo de diagnóstico diferencial "Endo". Se utiliza para seleccionar colonias de bacterias que pueden descomponer la lactosa. Inicialmente, este medio tiene un color rosado. Si una colonia de microorganismos no es capaz de descomponer la lactosa, adquiere el color blanco habitual. Si las bacterias pueden descomponer este sustrato, se vuelven de un característico color rojo brillante.
Miércoles optativos
Los laboratorios de diagnóstico a menudo trabajan con hisopos que contienen muchos tipos diferentes de bacterias. Obviamente, para un trabajo de calidad, es necesario seleccionar de alguna manera las colonias que necesitamos entre docenas de extraños. Aquí es donde puede ayudar un medio de crecimiento bacteriano, que está idealmente formulado para admitir solo un tipo de microorganismo.
Por ejemplo,dicho entorno electivo es adecuado solo para la reproducción de Escherichia coli. Entonces, de sembrar muchas bacterias en una placa de Petri, veremos solo colonias de la misma Escherichia coli y no más. Antes de comenzar a trabajar, es necesario conocer bien el metabolismo de la bacteria estudiada para poder seleccionarla con éxito de una mezcla de otras especies.
Medios de cultivo sólidos, semisólidos y líquidos
Las bacterias se pueden cultivar no solo en sustratos sólidos. Los medios nutritivos difieren entre sí en su estado de agregación, que depende de la composición durante la fabricación. Inicialmente todos tienen una consistencia líquida, y cuando se les agrega gelatina o agar en cierto porcentaje, la mezcla se solidifica.
Los medios de cultivo líquidos generalmente se encuentran en tubos de ensayo. Si es necesario cultivar bacterias en tales condiciones, agregue una solución con una muestra de cultivo y espere de 2 a 3 días. El resultado puede variar: se forma un precipitado, aparece una película, flotan pequeños copos o se forma una solución turbia.
El medio de cultivo denso se utiliza a menudo en la investigación microbiológica para estudiar las propiedades de las colonias bacterianas. Dichos medios son siempre transparentes o translúcidos para que sea posible determinar correctamente el color y la forma del cultivo de microorganismos.
Preparación de medios
Los sustratos como las mezclas de carne y peptona a base de caldo, gelatina o agar son muy fáciles de preparar. Si necesita convertir un sustrato sólido o semilíquido en líquidoagregue 2-3% o 0, 2-0, 3% de gelatina o agar, respectivamente. Desempeñan un papel importante en el endurecimiento de la mezcla, pero no son fuente de nutrientes. Así, se obtienen medios nutrientes adecuados para el crecimiento de un cultivo bacteriano.